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MALDI-TOF技術
MALDI-TOF技術主要對單一蛋白質(考/銀染的2D或DIGE膠點樣本)或成分比較簡單的蛋白混合液進行定性分析。
技術原理
MALDI-TOF技術——利用基質輔助激光解吸電離(MALDI)/飛行時間(TOF)技術來表征生物分子,基質輔助激光解析(MALDI)技術是將樣品均勻包埋在基質中,基質吸收激光提供的能量而蒸發,攜帶部分樣品分子進入氣相,并將一部分能量傳遞給樣品分子使其離子化。TOF的原理是離子在電場作用下加速飛過飛行管道,根據到達檢測器的飛行時間不同而被檢測,即測定離子的質荷比(M/Z)與離子的飛行時間成正比,從而檢測離子MALDI-TOF在分子量可測范圍內,分辨率和所測分子量的準確性等方面都優于同類技術。采集數據漸變,大大簡化從樣品制備到數據分析的過程。在windows操作界面下通過鼠標來改變參數,變化激光強度和編制報告??煞謩e調節離子,加速柵和反射器電壓等,控制樣品的位置和激光照射的輕度。高準確度的質量數據增強了數據庫的查詢能力,可減少測量參數和鑒定結構所需的實驗數據。分析能力強-溫和的離子化條件增強了測量生物多具體,蛋白質,肽和DNA的能力。
實驗流程
儀器型號
MALDL-TOF/TOF質譜儀4800(ABI),布魯克ultrafleXtreme MALDI TOF/TOF
技術優勢
1.適合較純、成分簡單或單一的蛋白樣品,如銀染或考染的蛋白膠點、標簽純化的蛋白樣品
2.周期較短
應用領域
蛋白質或多肽的鑒定分析
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